光度噪聲是影響紫外可見分光光度計(jì)的重要指標(biāo)

　　一、光度噪聲對(duì)分析測(cè)試誤差的影響

　　在光度分析中, 特別在紫外可見光度分析中, 光度噪聲( Photomet ricNoise ) 是影響比耳定律偏離的zui主要因素之一, 是主要分析誤差的來(lái)源。若已知光度噪聲為N, 則可根據(jù)A. J. Owen 提出的計(jì)算公式: 噪聲誤差(%) =N×100/ A, 計(jì)算出不同N 的情況下, 吸光度的相對(duì)誤差ΔA/ A (ΔA 為吸光度誤差, A 為吸光度真值) 與A 的關(guān)系。或求出不同A 的情況下, ΔA/ A與N 的關(guān)系。

　　目前國(guó)內(nèi)外有些儀器制造者和使用者們, 不注重儀器的光度噪聲對(duì)分析測(cè)試結(jié)果的影響。有的廠商甚至在樣本上不給出光度噪聲這個(gè)重要指標(biāo)。有些廠商( 技術(shù)人員) 在測(cè)試光度噪聲時(shí), 只測(cè)15min 或30min , 這些都是不對(duì)的,是值得注意的重要問(wèn)題。

　　紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲是分析誤差的主要來(lái)源之一, 它主要影響或限制是被測(cè)試樣濃度的下限。目前, 上zui的紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲為±0. 0002Abs ( 峰-峰值, 如美國(guó)Va rian 公司的Ca ry5 )。它的測(cè)量下限在0. 02Abs 時(shí), 測(cè)量誤差可達(dá)到1%。國(guó)外還有許多紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲都在±0. 0002Ab s ( 峰-峰值, 如美國(guó)P-E 公司的Lambda900 等)。這些光度噪聲很低的紫外可見分光光度計(jì), 在海洋生物學(xué)和生命科學(xué)的研究工作中, 或在分析小量樣品時(shí), 是非常有實(shí)用價(jià)值的。目前國(guó)產(chǎn)的紫外可見分光光度計(jì), 光度噪聲都比較大。只有極少數(shù)儀器的光度噪聲很小, 如北京普析通用公司的TU-1901 , 其光度噪聲為±0. 0004Abs(峰-峰值) 。 噪聲限制的測(cè)量下限為0. 04Abs 時(shí), 由噪聲引起的測(cè)量誤差還可達(dá)到1%。所以, 我國(guó)的紫外可見分光光度計(jì)制造者們, 要下大工夫去努力降低儀器的光度噪聲。

　　目前, 國(guó)內(nèi)外的許多生產(chǎn)廠商, 不在樣本中給出儀器的光度噪聲, 這是不妥當(dāng)?shù)摹Ｒ驗(yàn)? 不給出儀器的光度噪聲, 使用者就無(wú)法判斷儀器在低濃度下是否適用, 其靈敏度、準(zhǔn)確度是否能達(dá)到使用要求, 很難判斷儀器的適用性和可靠性, 將給使用者帶來(lái)很大的麻煩。因此, 不管是低檔紫外可見分光光度計(jì),還是紫外可見分光光度計(jì), 都應(yīng)向使用者提供光度噪聲這個(gè)極其重要的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)。紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度是有很大的關(guān)系的。一般來(lái)講, 掃描速度很快的紫外可見分光光度計(jì)的噪聲肯定是大的。反之, 如果一臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)的噪聲很小, 那它的掃描速度是不會(huì)太快的。所以, 目前上許多紫外可見分光光度計(jì)的制造商, 設(shè)計(jì)時(shí)都考慮到了掃描速度和光度噪聲之間的關(guān)系, 不會(huì)把掃描速度作得很快, 而把光度噪聲作得很大。反之, 他們也不會(huì)把光度噪聲作得很小, 而把掃描速度作得很慢。但目前, 國(guó)外的確有些制造商把他們的紫外可見分光光度計(jì)的掃描速度作得很快, 而忽視光度噪聲, 這是不對(duì)的。因?yàn)橐话銇?lái)講, 紫外可見分光光度計(jì)的掃描速度沒(méi)有光度噪聲重要。起碼掃描速度對(duì)分析測(cè)試誤差沒(méi)有影響。而噪聲則是主要分析誤差的來(lái)源之一。

　　二、光度噪聲的表示方法

　　光度噪聲是儀器的一種隨時(shí)間而變化、但又是隨機(jī)的輸出信號(hào)。它是紫外可見分光光度計(jì)分析誤差的主要來(lái)源之一, 它直接影響儀器的信噪比和檢出限。目前上對(duì)光度噪聲的表示方法有兩種: 一是用吸光度( Abs ) 表示;二是用透射比( %T ) 表示。日本和我國(guó)的紫外可見分光光度計(jì)生產(chǎn)廠商用透射比( %T ) 表示的較多, 歐美等國(guó)的紫外可見分光光度計(jì)生產(chǎn)廠商用吸光度( Abs) 表示的較多, 應(yīng)該說(shuō)二者都可以。但用吸光度( Abs ) 表示更好。因?yàn)? 廣大使用者在使用紫外可見分光光度計(jì)的時(shí)候, 基本上都是用吸光度, 而不是用透射比。如果儀器的光度噪聲用透射比(% T ) 表示, 則在計(jì)算誤差時(shí), 還要把透射比換算成吸光度, 會(huì)給使用者帶來(lái)不必要的麻煩。

　　三、光度噪聲的測(cè)試方法

紫外可見分光光度計(jì)光度噪聲的測(cè)試, 目前接軌的測(cè)試方法是: 儀器冷態(tài)開機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 試樣和參比比色皿均為空氣、設(shè)置吸光度為0Abs、光譜帶寬為2nm、波長(zhǎng)為500nm。將儀器從長(zhǎng)波到短波, 進(jìn)行時(shí)間掃描1h。在1h 內(nèi), 任取10min 的測(cè)試數(shù)據(jù), 在多個(gè)10min 的測(cè)試數(shù)據(jù)中, 以那個(gè)10min 內(nèi)zui大的峰-峰值, 作為500nm 處的噪聲。

關(guān)鍵詞：光度噪聲；紫外可見分光光度計(jì)；美析儀器；UV-1800